利福平ELISA檢測(cè)試劑盒

本測(cè)試盒用競(jìng)爭(zhēng)免疫分析法定量測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中的利福平

  • 產(chǎn)品品牌: REAGEN
  • 產(chǎn)品貨號(hào): RND99131
  • 產(chǎn)品規(guī)格: 48/96T
  • 產(chǎn)品適用: 適用于利福平檢測(cè)
  • 產(chǎn)地來源: 中國深圳
  • 試劑盒組成: 檢測(cè)試劑、說明書
  • 保質(zhì)期: 12個(gè)月

本測(cè)試盒用競(jìng)爭(zhēng)免疫分析法定量測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中的利福平。該測(cè)試盒反應(yīng)孔可拆卸,可測(cè)單份樣品,也可測(cè)多份樣品。定量分析時(shí)需有含450nm波長(zhǎng)的微孔板酶標(biāo)儀。

1 概要

利福平(Rifampicin)一種廣譜抗生素藥物,對(duì)結(jié)核桿菌有較強(qiáng)抗菌作用,對(duì)革蘭氏陽性或陰性細(xì)菌、病毒等也有療效,主要用于治療結(jié)核病、腦膜炎和金黃色葡萄球菌感染,外用可治療沙眼等。

2 測(cè)定原理

本測(cè)試盒利用固相酶聯(lián)免疫吸附原理,采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法進(jìn)行測(cè)定。用抗原包被微孔板,加入利福平標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗利福平酶標(biāo)單克隆抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)后,將未與包被抗原結(jié)合的抗體洗去;再加入酶標(biāo)記的抗鼠IgG抗體孵育,加入顯色液,經(jīng)終止液終止后,用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定OD值。

3 提供的物品

微孔板

6個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(各0.5mL

標(biāo)準(zhǔn)10ng/mL ……………………………………………………………........直接使用

標(biāo)準(zhǔn)21.0ng/mL ………………………………………………………................直接使用

標(biāo)準(zhǔn)32.0ng/mL ……………………………………………………................直接使用

標(biāo)準(zhǔn)45.0ng/mL ……………………………………………………................直接使用

標(biāo)準(zhǔn)520.0ng/mL ………………………………………………………........直接使用

標(biāo)準(zhǔn)650.0ng/mL ……………………………………………………........直接使用

抗體溶液(6mL) …………………………………………………………………直接使用

酶標(biāo)物(12mL) …………………………………………………………………直接使用

顯色液(12mL) …………………………………………………………………直接使用

終止液(6mL) ………………………………………………………………………直接使用

10X濃縮洗液(30mL) ……………………………………………………………稀釋使用

4 盒中未提供,需自備物品

微孔板酶標(biāo)儀(含450nm)、去離子水或蒸餾水。

5 操作者注意事項(xiàng)

終止液為0.5M硫酸,避免接觸皮膚。每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。每步加樣時(shí)間應(yīng)控制在5min內(nèi)。孵育過程中應(yīng)避光。不要使用過期試劑盒。不要交叉使用不同批號(hào)的試劑盒中的試劑。

6 儲(chǔ)存條件

保存試劑盒于2~8。不要冷凍

顯色液對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。

將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中,置2~8保存

7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志

標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個(gè)單位A450nm<0.5時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

8 樣品處理 

----細(xì)胞培養(yǎng)液無需前處理,直接進(jìn)行測(cè)定

9 酶免疫分析程序

----濃縮洗液為10倍濃縮液,使用時(shí)與去離子水或蒸餾水按體積比1:9稀釋后使用。

----取所需數(shù)量的板條插入微孔架,記錄樣品及標(biāo)準(zhǔn)的位置。

----加入50mL標(biāo)準(zhǔn)品或處理好的樣品到微孔,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品必須使用新的吸頭。

----加入50mL利福平單克隆抗體溶液到每個(gè)微孔中(注意移液器管尖不要接觸到孔中的液體,避免交叉污染),37孵育90min

----甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,最后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。

----每孔加入酶標(biāo)物100mL,37孵育60min

----甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,最后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。

----每孔加入顯色液100mL37孵育15 min。

----每孔加入終止液50mL,立即用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)450nm處測(cè)定吸光度值(OD值)。

10 樣品濃度計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)溶液OD值與標(biāo)準(zhǔn)1OD值的比值為縱坐標(biāo),所對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(ng/mL)的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品OD值與標(biāo)準(zhǔn)1OD的比值,可從曲線上得到對(duì)應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo),即為利福平濃度的對(duì)數(shù)值,求得反對(duì)數(shù)即為測(cè)定液中利福平濃度Cng/mL

11 主要技術(shù)指標(biāo)及參數(shù)

11.1  低檢出濃度1.0 ng/mL。 

11.2  加標(biāo)回收率在70-120%,條內(nèi)變異系數(shù)10%,條件變異系數(shù)15%。 


企業(yè)愿景

    公司將一如既往的視誠信為最重要的文化精神;在經(jīng)營決策和管理的全過程中信守“以產(chǎn)品質(zhì)量、優(yōu)質(zhì)服務(wù)”為原則和“為人類健康服務(wù)”為宗旨的理念;融前沿科技、全球資源與優(yōu)質(zhì)人才為資本,以開拓創(chuàng)新、銳意進(jìn)取、精益求精之精神,科學(xué)管理之導(dǎo)向,凝聚員工、客商之合力,同舟共濟(jì),為實(shí)現(xiàn)人類的食品安全和生物醫(yī)藥業(yè)的高速發(fā)展不懈奮斗!

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